國(guó)外資深專家解讀：“玻璃苗” , 另一種由高致病性弧菌感染所導(dǎo)致的疫病 ！

來源：騰氏水產(chǎn)商務(wù)網(wǎng) 時(shí)間：2024-10-14 14:21:39 查看：

眾所周知，弧菌在對(duì)蝦養(yǎng)殖過程中，在一定概率上與弧菌物種相關(guān)的感染問題對(duì)養(yǎng)蝦構(gòu)成重大挑戰(zhàn)，因?yàn)樗麄兣c多種綜合征和疾病有關(guān)，忽視這些感染會(huì)導(dǎo)致對(duì)蝦死亡率上升。弧菌是一種廣泛存在于水生和沉積物環(huán)境中的細(xì)菌屬，其特點(diǎn)是患病率高，大部分種群經(jīng)常存在于各種海洋生物中。

在對(duì)蝦育苗場(chǎng)，弧菌物種可以通過多種途徑傳播或滋生，這些包括通過種蝦、無節(jié)幼體、水源、單胞藻、活餌或管道設(shè)備等。此外，它們可以通過人員、設(shè)備、皮膚或通過氣溶膠傳播（Shinn 等人，subm.）。盡管各種各樣的弧菌病原體與蝦類養(yǎng)殖中的疾病有關(guān)，但在這里，我們重點(diǎn)關(guān)注目前影響對(duì)蝦行業(yè)的主要的弧菌種類，以及如何通過良好的養(yǎng)殖和衛(wèi)生規(guī)范、生物安全、監(jiān)測(cè)和消毒來控制它們。

玻璃苗病

玻璃苗?。═PD） 也稱為高致死弧菌病 （HLVD）、仔蝦期透明病 （GPD） 或細(xì)菌玻璃化綜合征 （BVS），是南美白對(duì)蝦仔蝦期（PL） 的一種疾病狀況，導(dǎo)致中國(guó)（2020 年初被發(fā)現(xiàn)）和越南的對(duì)蝦高死亡率。TPD 有兩個(gè)主要癥狀。首先視覺可見，受影響的仔蝦，尤其是在仔蝦2~4 期，明顯出現(xiàn)腸道空、無色，肝胰腺顏色半透明，活動(dòng)遲緩。通常會(huì)放苗后 的第3~5 天發(fā)病，而在感染后幾個(gè)小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)死亡，在 24-48 小時(shí)內(nèi)高達(dá) 80-100%死亡率。組織學(xué)檢查顯示，肝胰腺和中腸細(xì)胞的表層大面積脫落。關(guān)于玻璃苗病的兩個(gè)潛在原因：第一，這是由攜帶熱不穩(wěn)定溶血素基因（即 tlh 或 ldh 基因）的副溶血弧菌菌株引起的。第二，某些玻璃苗病實(shí)例可能歸因于 RNA 白石病毒（Marnaviridae 病毒科）的感染（Xu 等，2023 年）。

目前，細(xì)菌感染和病毒感染的具體比例仍不清楚。為確保準(zhǔn)確性，未來的研究應(yīng)該明確說明感染是源于攜帶溶血素基因的副溶血弧菌致病菌株（即 VpTPD），還是來自白石病毒感染（即白石病毒TPD）。

因此，無法單純從肉眼上看到的空腸空胃來判斷蝦苗是否為受玻璃苗致病原的病害所感染，這應(yīng)該通過分子診斷測(cè)試進(jìn)行驗(yàn)證。

根據(jù)Yang等（2022年）的研究報(bào)道，有效地表明，玻璃苗病歸因于攜帶熱不穩(wěn)定溶血素基因的副溶血性弧菌。他們是通過一些系列試驗(yàn)得以證明該結(jié)論。首先，對(duì)受感染的蝦苗樣本的PCR測(cè)試結(jié)果為AHPND（急性肝胰腺壞死?。╆幮浴?/p>

隨后，用TCBS擴(kuò)培的細(xì)菌菌落攻毒樣本，導(dǎo)致顯著高的死亡率，表明細(xì)菌因素的存在。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)包括對(duì)受感染的對(duì)蝦樣本進(jìn)行超聲處理從而將細(xì)菌細(xì)胞破碎，然后用處理后的樣本攻毒健康對(duì)蝦，結(jié)果為相似的高死亡率，表明存在毒素致病。此外，將受感染水池中的水通過0.2微米濾膜過濾以去除細(xì)菌和大多數(shù)病毒，結(jié)果未出現(xiàn)死亡，所以，能夠排除病毒作為病因的可能性。最后，通過16S、以及與GenBank中的序列比較后發(fā)現(xiàn)了熱不穩(wěn)定溶血素基因，確認(rèn)了該病原。

關(guān)于熱不穩(wěn)定溶血素基因?qū)е虏Ａ绨l(fā)生的更多依據(jù)

首先，ldh基因與細(xì)菌的染色體相連，這使其不像編碼Pir-like毒素（PirAVP和PirBVP）的pVA1質(zhì)粒那樣容易傳播到其他弧菌物種，目前已有幾種弧菌菌株感染了pVA1質(zhì)粒，所有這些菌株都可能引起急性肝胰腺壞死病。

熱穩(wěn)定直接溶血素（TDH或TSD）和熱不穩(wěn)定溶血素（TLH或LDH）之間的區(qū)別在于它們對(duì)于溫度的耐受性。前者在 100°C 的溫度下 10 分鐘內(nèi)不會(huì)滅活，而熱不穩(wěn)定溶血素即使在較低溫度下也可以失活。

正常蝦苗，用特殊攝影設(shè)備拍攝

關(guān)于熱穩(wěn)定直接溶血素基因的來源，它在大多數(shù)環(huán)境菌株的副溶血性弧菌中不存在。然而，它存在于某些霍亂弧菌非O1菌株和某些副溶血弧菌中，有趣的是，它在所有霍利薩弧菌（V. hollisae）菌株中都存在。雖然大多數(shù)副溶血性弧菌菌株中沒有TDH基因，但一些可以引起人類問題的菌株攜帶兩個(gè)TDH基因序列。導(dǎo)致對(duì)蝦TPD的菌株攜帶一個(gè)TDH基因序列。

關(guān)于副溶血性弧菌如何感染的問題存在一些爭(zhēng)議。這可能是通過插入序列樣元素（ISV）的作用，將溶血素基因插入細(xì)菌染色體，從而使細(xì)菌能夠產(chǎn)生溶血素毒素。

由于篇幅有限，我們后面會(huì)繼續(xù)給大家介紹急性肝胰腺壞死病和玻璃苗病如何檢測(cè)，如何做好生物防控。敬請(qǐng)大家繼續(xù)關(guān)注！

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